四川羊肚菌菌种生产(chǎn)基(jī)地浅谈羊肚菌菌种的培育方法
发(fā)布日期:2019-05-06
本技术公开了一种中药材的优质(zhì)高(gāo)产种(zhǒng)植(zhí)方法。该方法包括以下(xià)步骤:(1)母种的(de)制作及培养,包括①制作(zuò)母种培养(yǎng)基:将(jiāng)250g土豆、30g琼脂(zhī)、25g葡(pú)萄糖(táng)和3g维生素B放(fàng)入2000ml的水中加热,直至琼脂完全(quán)煮化即(jí)得母种培养基,②培育母种:将试管放入密封的无菌(jun1)接种箱中,每个(gè)试管中接入1cm×1cm的(de)菌丝后,置于20℃培养箱中,直(zhí)至生长成母种;(2)原种的(de)制(zhì)作及培养(yǎng),包括①制作原种培养基:取小(xiǎo)麦80%、木销10%和麦麸10%,将所述小(xiǎo)麦煮熟(shú)后捞出,与(yǔ)所述木(mù)销和麦麸(fū)搅拌(bàn)均(jun1)匀,水分控制在60-80%,100℃下保温6小时,②培育原种;(3)栽培(péi)中的制作及培(péi)养(yǎng),包括①制作栽培种培养基和②培育栽培(péi)种。本技术中,培育出优良(liáng)的(de)羊肚菌菌(jun1)种,提高了(le)种植的存活率。
具体实施方式
一种羊肚菌菌种的培育方(fāng)法,该(gāi)方法包(bāo)括以下步骤:
(1)母种的制(zhì)作及培养
①制作母种培养基:将250g土豆,30g琼(qióng)脂(zhī),25g葡萄糖和3g维生素B放入(rù)2000m1
的水中加热(rè),直至琼脂完全(quán)煮化即得母种培养基;
②培育(yù)母种:取所述母(mǔ)种培养基 200ml装入300ml的试管中,用棉花(huā)塞住管口,将所述试管放(fàng)在125℃的(de)高压灭菌锅内灭菌(jun1)1. 5h冷却至室(shì)温后,将所述试管放入密封的无菌接种箱中,每(měi)个试(shì)管中接入1cmX 1cm的菌丝后,置于20℃培养箱中(zhōng),直至生长(zhǎng)成母种(zhǒng)。
在步骤(1)中,土豆需(xū)要预先放入水中煮半(bàn)小时,之(zhī)后将其捞山,再与琼脂、葡萄糖(táng)、维(wéi)生(shēng)素B一起放入水中煮,直(zhí)至琼脂煮化(huà),将煮(zhǔ)好的培养基放在试管里,等(děng)凝固之后,再用棉花寒住试管的管口。进(jìn)行母(mǔ)种(zhǒng)的(de)培育时,在将(jiāng)试(shì)管放入接种箱之前,还需要用75%的酒精擦拭试管,对试管的外壁(bì)进行洒精消毒。
在将试(shì)管放进无(wú)菌(jun1)接种箱内时,还需要将(jiāng)用于接种(zhǒng)的下其一同放进接种箱的(de),如:托盘、酒(jiǔ)精灯、打火(huǒ)机(jī)、器皿、接种钩、镊子等一起放入接种箱内进行消毒(dú)处理.对于接种箱内的消毒处理,可以(yǐ)将装有高锰酸钾和(hé)甲(jiǎ)醛混合物的被子放入接种箱内,消毒时保证接种箱的密封。
(2)原种的制作及培养
①制作原种培养基:以质量分(fèn)数计,取小(xiǎo)麦80
%、木销10%和麦麸10%,将所(suǒ)述小(xiǎo)麦煮熟后(hòu)捞(lāo)出,与所述木销和麦(mài)数搅拌(bàn)均匀,水分控制在60-80 %
,装入(rù)培(péi)养(yǎng)瓶中,瓶(píng)口用棉花塞住(zhù),将所(suǒ)述培养瓶放在火菌锅里火菌(jun1)后,100℃下保(bǎo)温6小时(shí),取出冷却后即得原种培(péi)养基;
②培育原种(zhǒng):将(jiāng)所述培养瓶和(hé)装有母种的试管放入接种箱中(zhōng)密封半小时后(hòu),再将试(shì)管中的毋(wú)种接入到所述原(yuán)种培养基的培养(yǎng)瓶中,保持温度20℃即可。
(3)较(jiào)培中的制作及(jí)培(péi)养
①制作栽培种(zhǒng)培养基:以质量分数(shù)计(jì),取小麦75%煮(zhǔ)熟后捞出,放(fàng)入15%木销、
5%麦麸(fū)和5%泥上搅(jiǎo)拌均匀,含水(shuǐ)量60% -80%.装(zhuāng)入聚丙烯袋(dài)中(zhōng)封(fēng)口,将所述(shù)聚丙(bǐng)烯袋放在(zài)灭菌锅里灭菌.常压100℃下保存4小(xiǎo)时,取出冷却(què)至室温:
②培育栽(zāi)培种(zhǒng):将所(suǒ)述聚丙烯(xī)袋(dài)和原种培养基的(de)培(péi)养瓶(píng)置于接种箱中密封半小时后(hòu),再将(jiāng)步骤(zhòu)(2)培(péi)养的原(yuán)种接入(rù)到所述聚丙烯袋巾,在20℃环(huán)境下培养15-20天可(kě)获得栽培(péi)种。
在上(shàng)述的步骤(1)之前,还需要(yào)采集新鲜的羊肚(dù)菌子实体,将子实体切成直径
2-3mm的(de)菌块,取经过高压灭菌的PDA培养(yǎng)纂,将所述菌块放在PDA培养基(jī)上,将所(suǒ)述PDA培养基置于(yú)20℃的培(péi)养箱中,,周(zhōu)后可获得菌丝。
在本方(fāng)案中,接种箱始终(zhōng)处于(yú)无菌状态,在进行(háng)培养基的接种处理时(shí),在接种箱内放(fàng)入一杯装(zhuāng)有高(gāo)锰酸(suān)钾和甲醉的混合液(yè)体,用于(yú)对接种箱内的空(kōng)气进行杀菌消毒处理(lǐ)。
与现有技术相比(bǐ).本技术实施例具有以下优点:
通过应用本技术(shù)实施例(lì)的(de)技术(shù)方案(àn),在羊肚菌菌种的培育过程中,通过对现有技术中的培养基配方(fāng)进行改进,在菌种培育的各阶段采用不同(tóng)的培养基达(dá)到最好(hǎo)的培育效果,木方案提供的菌种培育方(fāng)法,培育出的(de)羊肚菌菌种品质(zhì)优良,同(tóng)时,大(dà)大提(tí)高了羊肚菌(jun1)种植的(de)存(cún)活率。
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